NIBSC 16/250 KRAS基因组密码子12和13突变国际标准品简介
品牌:英国NIBSC标准品
CRM code(货号):16/250
英文名称:1st International Reference Panel for genomic KRAS codons 12 and 13 mutations
描述:KRAS基因组密码子12和13突变国际标准品
产品用途:
该面板由八个单独编码的安瓿组成,每个安瓿都含有从人类细胞系中提取的冻干、纯化的基因组DNA(gDNA)。该面板包括七种材料,每种材料都有不同的KRAS密码子12或13基因型、共有突变百分比和共有突变体,以及每二倍体人类基因组的KRAS总拷贝数。此外,该面板还包括七种KRAS密码因子12和13基因型的gDNA纯合野生型材料(材料代码16/266)。携带感兴趣的KRAS突变的材料可以通过应用针对每种材料的特定计算来稀释,以产生KRAS共识突变百分比范围内的标准品。该面板旨在用作校准二级标准品、试剂盒和分析的主要标准。这些材料不作为运行控制。
这些材料经过外部实验室的测试,表明适合作为下一代测序(NGS)、Sanger测序、实时PCR、焦磷酸测序、数字PCR(dPCR)、基质辅助激光解吸/电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱分析(MassARRAY®)、KRAS StripAssay®、高分辨率熔融分析(HRM)、扩增难治性突变系统PCR(ARMS-PCR)、PCR反向序列特异性寡核苷酸探针技术(PCR-rSSO)、微测序和限制性片段长度多态性分析(RFLP)的标准品。该小组由世界卫生组织(世界卫生组织)生物标准化专家委员会于2017年成立,是世界卫生组织di一个基因组KRAS密码子12和13突变、NIBSC代码16/2501的国际参考小组。这些材料不应用于任何其他用途。数据分析必须侧重于KRAS。不得试图确定源材料捐赠者。
该小组在一项涉及56个实验室和68种测试方法的国际合作研究中进行了测试。从最一致的方法NGS和dPCR中获得八种材料的基因型和共有突变百分比(表1)。最终用户能够使用基于突变体和总KRAS拷贝数的稀释公式进一步稀释突变材料(用野生型KRAS密码子12和13材料16/266,或校准到材料16/266的另一种野生型基因组DNA),以在较低的共识突变百分比范围内达到进一步的标准,从而可以实现测定校准,见下文第7节和附录I。

生物材料原产国:英国。
该小组由八个单独编码的安瓿组成,每个安瓿含有约5μg从人类细胞系中提取的冻干纯化基因组DNA(16/266材料为25μg)。采用盐析法提取基因组DNA,在冷冻干燥前用5mg/ml海藻糖在Tris-EDTA缓冲液中稀释。

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